TUhjnbcbe - 2021/2/18 19:14:00
背景介绍Meckel综合征4型（MKS4）[MIM#]是一种常染色体隐性遗传的围产期致死性纤毛疾病，其主要临床表现为：枕部脑膨出、多囊肾发育不良、轴后多指畸形及肝胆导管板畸形。Meckel综合征患者通常在出生前或出生后不久死亡。MKS的发病率为1/。在芬兰和比利时人群中，MKS的发病率要高于其他人群。从遗传学上讲，MKS高度异质性，它与CEP、MKS1、B9D1、B9D2、CC2D2A、RPGRIP1L、TMEM67、TMEM这组基因的生殖系变异有关，这8个基因及其编码的蛋白在纤毛形成中起着关键作用。结构上，纤毛位于细胞表面，维持脑细胞、肾细胞和肝细胞等细胞的结构和功能，并参与相邻细胞之间的信号传递。因此，此组基因任何一个发生生殖系变异都会影响纤毛的结构和功能，最终导致MKS。CEP基因的变异可引起MKS4。CEP基因位于12号染色体长臂，其含有54个外显子，编码由个氨基酸组成的CEP蛋白（KD的中心体蛋白）。迄今为止，已报道的CEP变异有多种，其主要引起Leber先天性黑蒙[MIM#]和Joubert综合征[MIM#]。在已报道的CEP变异中，大多数为功能缺失变异（如无义、移码或剪接位点变异）。结果患者在本研究中，我们调查了一位35岁中国孕妇（G6P2），她与丈夫无血缘关系（图1：家系图）。经咨询了解到，这是该孕妇第六次怀孕（II-6），前五次怀孕成功产下两名女童（II-2,II-5），此外还有过三次不良妊娠史（II-1,II-3,II-4）。详情如下：II-1：年，第一次怀孕，男性胎儿，孕期B超检查发现胎儿脑积水、脑室外囊肿和羊水偏少（AFI：6.8cm），遂终止妊娠。II-2：年，第二次怀孕，成功产下一正常女婴。II-3：年，第三次怀孕，胎儿性别不详，B超检查发现胎儿的暗区有少量液体，羊水很少（AFI：1.0cm），遂终止妊娠。II-4：年，第四次怀孕，男性胎儿，常规B超检查发现胎儿侧脑室增大，颅骨结构异常，大范围液体暗区，脑中线结构变薄。此外，还发现胎儿颈部有一个无回声区，范围为5.4×6cm，清楚地显示内部分离，羊水很少（AFI：1.9cm）。遂再次终止妊娠。II-5：年，成功产下一正常的女婴。II-6：年，第六次怀孕，常规B超检查发现枕部颅骨的连续回声中断，约0.96cm宽。小脑组织隆起，位于颅外腔内，形成约1.56×1.2cm的肿块，颅腔明显变小（图3A）。胎儿肾脏明显增大（图3B）。左肾大小约为3.0×2.1×1.9cm，右肾大小约为3.0×1.8×2.0cm。有许多大小不一、形态各异的囊性回声区。孕18周行羊膜穿刺术的产前遗传学诊断（核型和染色体微阵列分析）。核型和染色体微阵列分析染色体核型分析未发现胎儿（第六次怀孕胎儿）染色体结构异常（46，XX）。染色体微阵列也未发现胎儿染色体中的任何致病性拷贝数变异（CNVs）。在核型和染色体微阵列均未发现异常后，根据胎儿多次相似的不良妊娠史和临床症状（妊娠期胎儿脑膜膨出和预后不良的双侧多囊肾），孕妇决定终止妊娠，并进行进一步的遗传分子诊断，以了解疾病表型的潜在原因。我们观察流产胎儿，发现枕部脑膨出（图4A），双侧多囊肾（占据整个腹部）（图4B,C）。我们尚未在胎儿的手和脚中发现轴后多指（图4D,E）。我们还发现双侧巨大的肾脏散布着小的、针头大小的囊肿（图4F）。肾脏组织学发现肾脏囊肿，肾皮质变薄，伴有肾小球萎缩（图4G）。肝组织学未见异常（图4H）。全外显子组测序和Sanger测序在CEP中发现了一个纯合的新变异我们对胎儿皮肤的DNA进行了全外显子组测序。全外显子测序鉴定了胎儿CEP基因21号外显子的一个新的纯合变异（C.T＞G，p.Leu＊）。该变异导致翻译的过早终止，最终导致仅含个氨基酸的截短蛋白形成，而野生型CEP蛋白是由个氨基酸组成的。它是一种功能缺失变异。Sanger测序证实，胎儿的父亲和母亲都以杂合状态携带该变异（图5）,胎儿的两个健康且表型正常的姐姐（II-2和II-5）不携带该变异。在个正常对照个体中没有发现这种变异。该变异也不存在于人类基因组变异数据库（HGMD，